實驗?zāi)康模?/strong>此次實驗是以腫瘤細(xì)胞為樣本,選用一體式超聲波細(xì)胞破碎儀對細(xì)胞樣品進(jìn)行超聲破碎,以便后續(xù)對細(xì)胞樣品的蛋白提取。
實驗步驟:
1、儀器準(zhǔn)備:一體式超聲波細(xì)胞破碎儀XM-650T
2、樣品準(zhǔn)備:培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞,從培養(yǎng)皿中刮下來放在1.5ml管中,加入100μl裂解液,置于冰上孵育30min。
3、儀器操作:打開儀器,使用2mm探頭,設(shè)置參數(shù):功率為10%,工作3s、間歇5s,間歇模式,總時間30s。
4、實驗結(jié)束:置于4℃離心機(jī)13000rpm離心20min,觀察樣品管內(nèi)樣品破碎效果,
實驗結(jié)果:
5、觀察到樣品已完全破碎,離心后的樣品呈澄清上清無雜質(zhì),沉淀物為細(xì)胞碎片。
實驗注意事項:
1.為保障蛋白樣品活性,操作全程在冰上進(jìn)行
2.因樣品量較少,超聲功率盡量調(diào)小,時間設(shè)為間隔模式
3.每個樣品不同,超聲完成一個樣品后,用純水清洗后進(jìn)行下一個